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人骨形態(tài)發(fā)生蛋白 2 (BMP-2)酶免試劑盒說明書

2020-10-19 瀏覽次數:2167

1. 人骨形態(tài)發(fā)生蛋白 2 (BMP-2)酶免試劑盒背景介紹:  

骨形態(tài)發(fā)生蛋白 2 (BMP-2)屬于TGF-β超家族蛋白。和其他的骨形態(tài)發(fā)生蛋白一樣,BMP-2 在骨和軟骨的發(fā)育中起重要作用。BMP-2 參與 Hedgehog 通路、TGF-B信號通路和細胞因子及其受體之間的相互作用,還參與心肌細胞分化和上皮細胞向間充質細胞轉化。BMP-2 和 BMP-7 都是骨誘導性的骨形態(tài)發(fā)生蛋白,實驗表明他們可有效誘導許多細胞類型中成骨細胞的分化。在可吸收膠原海綿上使用雙錐形螺紋融合器和重組人BMP-2 可維持椎間脊柱的融合、提高臨床療效、減少患有退行性腰椎間盤疾病患者在前路腰椎椎間融合術后的疼痛。

 

2. 人骨形態(tài)發(fā)生蛋白 2 (BMP-2)酶免試劑盒檢測原理:

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附檢測技術。特異性抗人 BMP-2 抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和生物素化的檢測抗體,經過孵育,樣本中存在的 BMP-2 與固相抗體和檢測抗體結合。洗滌去除未 結合的物質后,加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中 BMP-2 的濃度成正比。加入終止液終止反應,在 450 nm 波長(參考波長 570 - 630 nm)測定吸光度 值。

 

3. 人骨形態(tài)發(fā)生蛋白 2 (BMP-2)酶免試劑盒檢測的局限:  

1) 請在本試劑盒標示的有效期內使用。 2) 試劑盒的試劑不能與其他批號的試劑或其他來源的試劑混合使用。 3) 任何標準品稀釋、操作人員、移液技術、洗滌技術、孵育溫度、試劑盒保存時間的改變,都將影響結合反應。 4) 本試劑盒在設計上去除或降低了生物學樣本中的一些內源性干擾因素,并非所有可能的影響因素都已經去除。

 

4.人骨形態(tài)發(fā)生蛋白 2 (BMP-2)酶免試劑盒樣本采集與貯存

細胞培養(yǎng)上清 300 × g 離心 10 分鐘去除沉淀物,即刻檢測,或者分裝,-20℃以下貯存。

 

血清樣本 離心管收集血清。血樣凝集 30 分鐘后,1,000 × g 離心 10 分鐘。吸取血清樣本之后即刻檢測,或者分裝,-20℃以下 貯存。

 

血漿樣本 EDTA、枸櫞酸鈉或肝素抗凝收集血漿樣本。1,000 × g 離心 30 分鐘收集樣本。即刻檢測,或者分裝,-20℃以下貯 存。 本試劑盒可能適用于其它生物學樣本。細胞培養(yǎng)上清、血清和血漿已經過驗證。

 

注意:檢測前,樣本中可見的沉淀必須去除。不要使用嚴重溶血或高血脂的樣本。樣本應分裝并貯存于-20℃,以避 免人 BMP-2 活性的丟失。如果在 24 小時內檢測。樣本可以存放在 2 - 8℃。 避免樣本的反復凍融。在檢測前,冷凍樣本應緩慢地恢復至室溫,輕柔地混勻。

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